II.3.2. Initiation de la réplication.
Chez E. coli, il existe au niveau de l’ADN bicaténaire une origine unique de la réplication appelée OriC. Le locus OriC est constitué d’une séquence de 245 paires de bases. Cette séquence contient en tandem
- trois séquences nucléotidiques presque identiques constituées de 13 nucléotides chacune (séquences de type GATCTNTTNTTTT).
- quatre sites de liaison comportant un motif de 9 paires de bases pour une protéine appelée dnaA ou protéine d’initiation de la réplication, codée par le gène dnaA. Des copies multiples de la protéine dnaA vont s’associer avec l’ADN à l’origine de la réplication. Ces liaisons nécessitent de l’ATP. Cette étape est indispensable à la transformation localisée de l’ADN double brin en ADN simple brin.
Ces complexes vont ensuite fixer l’ADN hélicase (ou protéine dnaB), codée par le gène dnaB. L’ADN hélicase va catalyser le déroulement de la double hélice d’ADN en présence d’ATP, ce qui définira la future fourche de réplication. Une protéine appelée dnaC est indispensable à cette étape. Elle sera ensuite relâchée après fixation de la protéine dnaB à la fourche de réplication. Deux hélicases se lient à la région OriC, une hélicase pour chacun des brins d’ADN.
Les brins séparés de l’ADN sont stabilisés sous forme simple brin grâce à la fixation de protéines appelées SSB (pour « single strand binding »). Ces protéines SSB empêchent les deux brins d’ADN de se réapparier. Puis, il se formera rapidement un complexe appelé primosome entre l’hélicase et une enzyme appelée primase (ou protéine dnaG) qui synthétise
une amorce d’ARN. Après synthèse de l’amorce d’ARN (9-12 nucléotides), l’ADN polymérase III s’insère au niveau de la fourche de réplication, elle utilise l’amorce d’ARN pour commencer la synthèse de l’ADN. L’ADN polymérase III possède deux sites actifs qui seront capables de synthétiser les nouveaux brins d’ADN au niveau de la fourche de réplication. Le complexe de protéines qui se déplace le long de l'ADN pour catalyser la
réplication est appelé réplisome.
merci pour ces information
ردحذف